Прилади для визначення азоту/білка по Кьєльдалю

Метод К'єльдаля можна розбити на три стадії:

1. дижестування (мокре озолення)
2. дистиляція
3. титрування

Дижестування - це мінералізація гомогенізованого зразка в середовищі концентрованої
сірчаної кислоти в присутності каталізатора. Результатом мінералізації є розчин,
містить сульфат амонію:
Органічний N + H2SO4 = (NH4)2SO4 + H2O + CO2↑ + та ін
Дистиляція. В присутності надлишку лугу NH4+ перетворюється в NH3, який можна
відокремити від дижестованого зразка перегонкою з парою.
(NH4)2SO4 + 2NaOH = 2NH3↑ + 2H2O + Na2SO4.
Титрування. Аміак, кількісно перегнаного з парою, збирається в поглинальному розчині.
Вміст азоту в зразку визначається кількістю поглиненої аміаку. Титрування
проводять з використанням кольорових індикаторів або потенціометричним методом. Існує
два методу титрування: пряме і зворотне.
У разі зворотного титрування (застосовується для макро-методу К'єльдаля) в якості
поглинаючого розчину використовується точно виміряний об'єм стандартного розчину кислоти
(сірчаної, соляної):
2H2SO4 + 2NH3 = (NH4)2SO4 + H2SO4(надлишок);
Надлишок кислоти титрують розчином лугу:
(NH4)2SO4 + H2SO4(надлишок) + 2NaOH = (NH4)2SO4 + Na2SO4 + 2H2O.
При прямому титруванні замість стандартизованого розчину сильної кислоти використовують
розчин борної кислоти. Перегнаного аміак утримується в розчині за рахунок освіти
амонійно-боратного комплексу: H3BO3 + NH3 = (NH4H2BO3) + H3BO3 (надлишок);
Утворений амонійно-боратний комплекс титрують стандартним розчином кислоти:
2 (NH4H2BO3) + H2SO4 = (NH4)2SO4 + 2H3BO3
Пряме титрування більш зручне, так як припускає використання лише одного
стандартного розчину.

Схема кількісного визначення азоту по Кьєльдалю:

1. Перемолоти або гомогенізувати зразок
2. Зважити або відібрати зразок піпеткою
3. Кількісно перенести зразок у пробірки
4. Додати кислоту та сіль для підвищення температури кипіння
5. Додати каталізатор, якщо він не містився у кислоті
6. Помістити пробірки в діжестор
7. Мінералізувати (дижестувати) зразок
8. Охолодити пробірки
9. Помістити склянку для збирання дистиляту в дистилятор
10. Запустити запрограмований цикл дистиляції
11. Відтитрувати дистилят
12. Вирахувати результати